疏水作用色谱柱
在疏水作用色谱法(HIC)中,弱非极性固定相与高浓度的盐的水溶液同时使用。该方法主要通过减少盐的浓度来分离蛋白。
在反相色谱中,蛋白通过与填料上烷基或芳基相互作用保留下来。
不同于反相色谱,在疏水反应色谱中上述官能团的密度较低,且蛋白分子只在一个或少数几个位置上吸附。
盐浓度较高时会产生吸附作用,但若加入低百分比浓度的有机溶剂降低盐浓度,则会产生脱附作用。
尽管二者均以疏水作用为基础,但HIC分离的选择性明显不同于反相LC。
相对于RPC,HIC的最高容量较低,但其优势在于:流动相条件(主要是含水流动相)通常不会破坏高阶蛋白质结构。