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采用TSKgel G5000PWXL 分离重组SARS-CoV-2 S蛋白
发布时间：
2022-10-20 11:15
*重组SARS-CoV-2 S蛋白（Recombinant SARS-CoV-2 S proteins）
【基本信息】
SARS-CoV-2属于冠状病毒科、β冠状病毒属，是一种球形、有包膜的单正链RNA病毒。主要编码4种结构蛋白：刺突糖蛋白（spike glycoprotein，S蛋白）、包膜蛋白（envelope protein，E蛋白）、膜蛋白（membrane protein，M蛋白）、核衣壳蛋白（nucleocapsid protein，N蛋白）。S蛋白是新型冠状病毒最重要的表面蛋白，是中和病毒感染抗体的主要靶点，也是疫苗设计的核心免疫原成分。S蛋白由S1和S2亚基组成，其中白受体结合域（RBD）位于S1亚基。这里对昆虫细胞中表达并纯化得到的了重组SARS-CoV-2 S蛋白及片段S1蛋白和RBD蛋白进行了高效尺寸排阻色谱（HPSEC）的分离和表征。
【样品制备】
重组SARS-CoV-2 S 蛋白及片段S1蛋白、RBD蛋白参考方法[1]制备。
【分析条件】
色谱柱：TSKgel G5000PWXL（I.D.7.8 mm×30 cm，10 μm）
流动相：10 mM PB（pH 7.4）
流速：0.5 mL/min
柱温：室温
检测器参数：UV @280 nm
样品：重组S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白
图1纯化后重组S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白分离色谱图
【结果与讨论】
采用高效凝胶色谱TSKgel G5000PWXL对纯化后重组SARS-CoV-2 S 蛋白及片段RBD、S1溶液进行了分离。实验结果表明：该色谱柱可有效实现纯化后重组SARS-CoV-2 S蛋白、S1蛋白及RBD蛋白的分离。RBD、S1和S在洗脱体积分别为9.0 mL、5.5 mL和5.3 mL的HPSEC谱图上均显示一个主峰（见图1）。
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