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Sephadex LH-20/葡聚糖凝胶填料
发布时间：
2022-10-20 11:16
Sephadex LH-20/葡聚糖凝胶简介：
全称为：羟丙基葡聚糖凝胶。常用商品凝胶的一种（另一种为交联葡聚糖凝胶Sephadex G)。Sephadex LH-20为Sephadex G-25（葡聚糖凝胶按交联度分类的其中一种商品型号）经羟丙基化处理后得到的产物，此时，葡聚糖凝胶分子中的葡萄糖部分将与羟丙基结合成下列醚键形式：-OH → -OCH2CH2CH2OH
与Sephadex G比较，Sephadex LH-20分子中-OH基总数虽无改变，但碳原子数所占比例却相对增加了，所以Sephadex LH-20不仅可在水中应用，也可在极性有机溶剂或他们与水组成的混合溶剂中膨润使用。
1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子，可以非常经济地大规模制备各种天然产物
2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身，分离结构非常相近的分子
3、载量可高达300mg样品/ml凝胶，极少需要再生，分离效果可保持十几年不变。
Sephadex LH-20/葡聚糖凝胶主要性能参数：
分离范围（球蛋白）100-4000
颗粒大小（μm）20-150
应用范围胆固醇，脂肪酸，激素，维他命，天然产物
pH稳定性2－13
最高流速（cm/h）500
Sephadex LH-20/葡聚糖凝胶/乙酸乙酯分离系统的原理及应用
除了以甲醇、丙酮、二氯甲烷为流动相外，我们还可以使用乙酸乙酯为流动相，以Sephadex LH-20为固定相，对某些混合物进行分离。乙酸乙酯，一种中等极性的疏质子溶剂，在分离某些低分子量有机物时，优于丙酮和二氯甲烷。在对混合物的洗脱顺序上，乙酸乙酯与丙酮、二氯甲烷相同，但其所使用的固定相Sephadex LH-20的柱床体积较小，分离速度更快。除此之外，Sephadex LH-20在乙酸乙酯中的膨胀程度小于在丙酮中的膨胀程度，因此，导致了膨胀后的Sephadex LH-20凝胶孔体积变小，孔径变窄，从而使其更易吸附低分子量的中等极性有机化合物，分离效果更好。乙酸乙酯对混合物进行分离的原理，主要是基于待分离物质间的极性和氢键的差异。
Sephadex LH-20/葡聚糖凝胶分离的技巧：
（1）分离时流速不可太快，切切不可心急，所谓欲速则不达；接馏分时可开全速，节省时间。
（2）柱子尽可能长，Sephadex LH20柱长的增加将极大地改善分离，所不要吝惜填料，宁可将填料全装在一根大柱子中，不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力，打击敌人。
（3）馏分一定要接的细，可1/10，或1/20个保留体积接成一馏分。
（4）洗脱体积一般为2-3个保留体积，对特殊保留强的化合物，可洗脱5个保留体积。
（5）鞣质成分死吸附严重，如不在乎填料者，可用Sephadex LH20分鞣质
（6）Sephadex LH20对黄酮类成分的分离效果极佳，方法很成型，有大量文献参考。
（7）填料反复使用，每次用完，一般可用甲醇将柱子洗干净，然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来，待用。暂时不用试可以水洗→含水醇洗（醇的浓度逐步递增）→醇洗，最后泡在醇中贮于磨口瓶中备用。如长期不用时，可在以上处理基础上，减压抽干，再用少量乙醚洗净抽干，室温充分挥散至无醚味后，60～80°C干燥后保存。
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